¿Qué es un Cultivo Líquido de Micelio, también conocido como Liquid Culture?
La conservación del micelio para su propagación sobre semilla de grano es un aspecto fundamental en el cultivo.
Los cultivos de micelio se pueden conservar principalmente de dos maneras: en placas de agar o en un cultivo líquido (también conocido como cultivo líquido, LC).
¿Diferencia? ¡Solo una!
Las placas de agar constan de:
agua + agar agar + nutriente
La cultura líquida da:
agua + nutrición
¿Cuáles son las principales ventajas y desventajas de utilizar cultivo líquido en lugar de placas de agar?
Las principales ventajas son principalmente 3
- Posibilidad de trabajar incluso en ambientes no estériles (mediante el uso de jeringas y agujas esterilizadas)
- Posibilidad de utilizarlo para inocular grandes cantidades de cereal estéril.
- Posibilidad de conservarlo durante mucho tiempo (en frigorífico)
Sin embargo, la desventaja es principalmente 1
- Dificultad para ver ciertos tipos de contaminación.
¿Cómo se prepara un cultivo líquido?
1. Primero necesitas tener un frasco y una tapa para cultivos líquidos.
Este tapón debe tener un puerto de inyección y un filtro para el paso del aire. ¡Echa un vistazo a estas gorras para hacerte una idea!
El filtro permitirá que su micelio respire mientras mantiene alejada la contaminación. Mientras que el puerto de inyección le permitirá utilizar agujas y jeringas estériles para la inoculación de LC y retirar LC para utilizarla para inocular cereal estéril.
2. Combine agua y el nutriente elegido (por ejemplo: extracto de malta) en una concentración máxima del 4% en el frasco (por ejemplo, 4 g por 100 ml de agua), tape y esterilice en una olla a presión durante 15 minutos a 15 psi ( 1 barra).
Si tu olla a presión alcanza presiones más bajas el tiempo será mayor. Asegúrate de no sellar completamente el frasco con la tapa, déjalo parcialmente enroscado pero asegúrate de sellarlo inmediatamente tan pronto como abras el frasco al final del ciclo (¡sin quemarte!).
Coloque papel de aluminio sobre la tapa para proteger el filtro del agua.
CONSEJO: Es conveniente insertar una barra agitadora magnética para agitadores magnéticos dentro del frasco para poder mezclar fácilmente su cultivo durante el crecimiento. Pero esto no es necesario. Puedes mezclar el líquido del interior con un giro de muñeca o con una jeringa: al tirar del líquido e inyectarlo nuevamente en el frasco, esto separará las hifas del micelio en crecimiento y estimulará el desarrollo.
¿Cómo se inocula un cultivo líquido?
Una vez que su LC esté esterilizado y haya alcanzado la temperatura ambiente, podrá inocularlo.
Para la inoculación recomendamos utilizar una jeringa de cultivo líquido , tanto por simplicidad como por velocidad de crecimiento. También se puede inocular micelio sobre agar, pero si no se hace en un ambiente estéril se corre el riesgo de contaminar el cultivo, ya que habrá que abrir el frasco para introducir el agar. De lo contrario, también es posible la inoculación con una jeringa de esporas. Sin embargo, esto no se recomienda ya que la esterilidad de las esporas no está garantizada y, por tanto, existe el riesgo de que el cultivo se contamine. Pero sin duda es posible obtener resultados positivos incluso de esta manera.
Una vez inoculado déjalo a temperatura ambiente, preferiblemente por encima de 20C, durante una o dos semanas y cuando veas un montículo de crecimiento micelial puedes empezar a mezclarlo. En cuanto veas que la mayor parte del líquido está formado por trozos de micelio denso, estará listo para ser utilizado.
¿Cómo se utiliza un cultivo líquido?
Tome una aguja y una jeringa esterilizada , extraiga su micelio e inyéctelo en una bolsa o frasco de cereales esterilizados .
¡Ahora ya sabes qué papel juega el cultivo líquido en el cultivo de setas y cómo prepararlo! Si quieres saltarte algunos de los pasos hemos preparado un kit de cultivo líquido que te permitirá tenerlo listo en un frasco ¡sin necesidad de esterilizarlo!
